产品简介
2×P6 High-Fidelity Premix 是将 PCR 反应用到的超保真 P6 DNA 聚合酶、buffer、dNTP Mixture 以及稳定剂以 2
倍的终浓度进行混合。使用时，只需在制品溶液中加入模板和引物便可进行 PCR反应，大大简化了操作过程，
降低了 PCR操作过程中污染的可能性。P6 High-Fidelity DNA Polymerase 是基于 Pyrococcus furiosus 的高温 DNA
聚合酶，具有耐热型 5´
-3´ 的聚合酶活力以及 3´
-5´的核酸外切酶活力，因此属于高保真 DNA 聚合酶（其保真度
达到普通 Taq 酶的 55 倍）。该酶经过生物工程改造后，其扩增能力、保真度都得到极大提升，并且具有广泛
的模板适应性，扩增速度达到 2-4 kb/min。优化的 Premix 针对 λ DNA 等简单模板的有效扩增长度可达 40 kb，
cDNA 有效扩增长度可达 15 kb，基因组有效扩增长度可达 20 kb。
| 产品组成 |
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| 无染料 |
21805-01 |
21805-02 |
21805-03 |
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| 2×P6 High-Fidelity Premix |
1 mL |
10× 1 mL |
50 mL(21805-2 × 5) |
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| Loading buffer |
1 mL |
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预混液应置于-20 ℃保存，避免反复冻融。
产品质控
（1）性能检测 1：
在 50 μL PCR 反应体系加入 25 μL premix、100 ng Human RP11 13M9-pBACe3.6 质粒，扩增 15 kb 的 DNA
目的片段，在 30 个循环扩增后经 1%琼脂糖凝胶检测可在 15 kb 处检测到非常亮且单一的目的条带。
（2）性能检测 2：
在 50 μL PCR 反应体系加入 25 μL premix、大肠杆菌菌落，扩增 5 kb 的 DNA 目的片段，在 30 个循环扩增后经 1%琼脂糖凝胶检测可在 5 kb 处检测到较亮的单一目的条带。
（3）大肠杆菌核酸残留检测：
在 20 μL 荧光定量 PCR 反应体系加入 10 μL premix（无染料）和大肠杆菌特异基因扩增引物（如 gapA）；在不加入大肠杆菌 DNA 模板的情况下，20 个循环内荧光信号值在基线范围。
常规 PCR 反应体系：
1，在冰浴上设置 PCR 反应（供参考）*：
模板: < 500 ng
2 × P6 High-Fidelity Premix: 25 μL Primer 1/2: 0.2 - 1.0 μM (final conc.)
灭菌蒸馏水 Up to 50 μL
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2，PCR 反应参数（供参考）**：
(起始变性): 95 ℃ 5 min
(解链): 95 ℃ 30 sec
(退火): 55 ℃ 30 sec
(延伸): 72 ℃ x min （30-35 循环：2 kb/min）
(最终延伸): 72 ℃ 7 min
(临时保存): 16 ℃ 保温
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* 针对不同类型的模板，所需的模板量会有不同，如基因组和质粒，等等；需要根据实际情况，添加合适的模板量。** 退火温度需根据引物和模板实际的 G+C 含量来作调整。
Version：20190101. 最新、最全使用方法以官网说明书为准！
沪公网安备 31011502016118号